《表1 3种胶原蛋白的二级结构》

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《原型胶原蛋白的提取分离及其结构鉴定》

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由图4可以看出，2号和3号样品，在198 nm左右有强的负吸收峰，这是Ⅱ型胶原分子构象中无规则卷曲结构的典型特征。在波长221 nm左右有弱的正吸收峰，这是左旋聚脯氨酸（P-Ⅱ）构型肽链圆二色谱的典型特征；213 nm处为0，这是胶原蛋白三螺旋结构的典型特征。因此可以初步判断纯化过程中胶原蛋白的三螺旋结构没有被破坏。结合电泳谱图，判断3号样品是比较纯的单一物种来源Ⅱ型胶原蛋白，2号样品可能也具有Ⅱ型胶原蛋白的特征结构，结合SDS-PAGE鉴别结果，初步判断2号样品掺有其他物种来源的Ⅱ型胶原蛋白。从表1可以看出，Ⅱ型胶原蛋白的主链主要为β-折叠、无规则卷曲结构，不包含α-螺旋[23]，按照蛋白质的结构模式分类[24]属于“全β型”三级结构。如图4，1号样品没有正吸收谱带，由圆二色谱的结果可以推断1号样品未见胶原蛋白的特征螺旋结构，虽然氨基酸测定得到羟脯胺酸的含量较高，但是判断是由于加工或者处理过程中蛋白被水解成小的氨基酸[25]，丧失了胶原蛋白的特征结构，其二级结构可能在酶解过程中被高温、酸碱、或者胶原蛋白自组装遭到一定程度的破坏和重组。