《表1 qRT-PCR引物序列》

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《血清半乳糖血凝素-1、紧密连接蛋白-1对甲状腺癌病情评估的价值》

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分别取约50mg甲状腺癌组织置于2mL EP管中，加入1mL Trizol用组织匀浆机剧烈匀浆5min，将匀浆液转移到EP管中加入200μg氯仿混匀后，4℃12 000r/min离心15min取上清，加入等体积的异丙醇混匀，4℃12 000r/min离心15min，弃上清，用800μL 75%的乙醇洗涤，待乙醇挥发后加入50μL的DEPC水溶解备用。取RNA溶解定量后，取2μg RNA 37℃反转录1h。使用qRT-PCR检测试剂盒检测基因的表达。扩增管家基因GAP-DH作内对照。反应条件为:95℃5min，1个循环；95℃30s、56℃40s、72℃40s，40个循环。以IQ5.0软件对PCR数据进行统计学分析，以各组目的基因表达水平与内参的比值为该基因的校正表达水平。扩增目的基因mRNA如下:细胞增殖促进基因ED-AG-1、Survivin、CCNG2；肿瘤侵袭基因:STAT3、FAK、Beclin-1。引物序列见表1。