《表1 引物序列：福建牡蛎新基因SMRP1的功能分析》

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《福建牡蛎新基因SMRP1的功能分析》

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从育苗场分别获得6个不同时期的福建牡蛎幼体:担轮幼体、D形幼体、壳顶幼体、眼点幼体、附着变态幼体和稚贝，将幼体集中收集到培养皿中，在培养皿中逐滴加入1 mol/L的MgCl2溶液，并且不时的在显微镜下观察，发现幼体从浮游状态到沉到底部且组织器官没有活动迹象时，将幼体收集到1.5 mL的离心管中，将含有MgCl2的海水尽量吸取干净，加入4%的多聚甲醛（paraformaldehyde，PFA）) 。每个时期幼体取3组平行样品。从厦门市第八市场获取新鲜捕捞的福建牡蛎成体，解剖后获得牡蛎7种不同组织样品，每个组织样品获取3个平行样品。样品加入TRIzol试剂，依据TRIzol试剂提取的方法提取不同样品的总核糖核酸（ribonucleic acid，RNA），ND-1000测定RNA的浓度。使用TaKaRa公司的反转录试剂盒，以1.5μg总RNA作为反转录模板，制备不同发育时期和不同组织的互补脱氧核糖核酸（complementary deoxyribonucleic acid，cDNA）文库，设计SMRP1基因特异性引物（表1），以反转录产物稀释10倍为模板，18S核糖体RNA为内参基因，用ABI7500热循环仪检测SMRP1基因在福建牡蛎幼体不同发育时期的表达变化[4]。荧光定量的数据处理采用公式:N=2-△Ct（Ct-18）（Ct代表荧光定量热循环仪所采集到循环数）。