《表1 引物序列及用途:金鱼草rosea1基因在陆地棉中的功能分析》

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《金鱼草rosea1基因在陆地棉中的功能分析》


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根据Butelli等提供的携带有2个目的基因的载体pJB1[19],设计接头引物(表1),加上attB接头后,运用技术构建过量表达载体即为所需载体。将rosea1基因分别运用BP-LR反应将其cDNA的开放阅读框(ORF)全序列构建至CaMV35S启动子驱动表达的表达载体pGWB408上,获得pGWB408-rosea1载体(简称Ros408)。将rosea1基因的ORF序列利用BP-LR反应构建至已构建好的纤维特异启动子启动的表达载体pEX3:pGWB407上,形成pEX3:pGWB407-rosea1载体(简称Ros407)。将携带有目的基因的质粒通过电转化法转入农杆菌菌株LBA4404中,经PCR检测选取阳性克隆进行棉花遗传转化。