《表1 脂质代谢相关基因q PCR引物列表》

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《皱纹盘鲍内脏脂质对人肝癌细胞HepG2脂质调节作用研究》

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以2×105 cfu/m L细胞密度接种Hep G2细胞于24孔细胞培养板中，细胞分别经30μg/m L和120μg/m L HDHL孵育处理24 h后，移除培养基上清，每孔加入300μL细胞裂解液，细胞总RNA提取参考天根培养细胞/细菌总RNA提取试剂盒说明书。利用Primer ScriptTM RT Master Mix（Perfect Real Time）反转录获得1μg c DNA。将c DNA以31、32、33、34、35倍梯度稀释，并以此为模板，使用Power SYBR Green PCR Master Mix分别配制各基因的q PCR体系。q PCR反应条件为95℃预变性600 s；三步法循环扩增95℃10 s，60℃10 s，72℃10 s（40个循环）。分析各基因特异引物的扩增效率及熔解曲线，以扩增效率达到90%～110%，熔解曲线为单峰的引物作为目的基因的特异引物。各目的基因的特异引物序列及扩增片段长度如表1所示。