《表2 q PCR引物列表》

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《过量表达EPSPS转基因对栽培稻与杂草稻杂种后代稻瘟病抗病性的影响》


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选取WH1+和WH1–进行q PCR测定,使用Vazyme品牌的2×Cham Q SYBR Color q PCR Master Mix q PCR预混液进行荧光定量扩增反应。在避光环境中将体系在冰上解冻,配制20μL反应体系(表2),使用BIO-RAD CFX96实时荧光定量PCR仪,设置反应程序进行扩增与荧光信号收集,q PCR扩增条件为50°C 2 min;95°C 15 min;95°C 10 s,60°C30 s,72°C 31 s,进行40个循环;95°C 30 s;65°C 1 min;95°C 15 s;60°C 15 s。数据分析采用Microsoft Office Excel 2019进行,以Actin的表达量为基线校正q PCR数据,以WH1–为对照计算基因相对表达量。