《表1 引物Tab.1 Primers》
根据GenBank中大肠杆菌MG1655、枯草芽胞杆菌168和野油菜黄单胞菌ATCC33913的木糖异构酶编码基因xyl A序列分别设计特异性引物,以各自基因组DNA为模板,扩增xylA基因片段,回收纯化PCR产物.双酶切(酶切位点见表1)将pXMJ19质粒线性化,利用Clon Express?ⅡOne Step Cloning Kit(Vazyme)同源重组的方法分别连接4个xylA基因片段和线性化质粒片段,获得过表达质粒pXMJ19-xylAeco、pXMJ19-xyl Absu、pXMJ19-xyl Axcc1和pXMJ19-xylAxcc2.采用类似方法构建pXMJ19-SDGDH-xyl Aeco质粒,通过上游引物引入谷氨酸脱氢酶启动子的Shine-Dalgarno(SD)及周边序列.通过电转化方法将这些过表达质粒转入谷氨酸棒杆菌ATCC13032感受态细胞中,得到相应菌株.
图表编号 | XD0042852100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.02.25 |
作者 | 李燕军、毛倩、韩洪军、高立栋、张顺棠、丁念念、陈宁 |
绘制单位 | 代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室天津科技大学生物工程学院、莲花健康产业集团股份有限公司博士后科研工作站、代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室天津科技大学生物工程学院、莲花健康产业集团股份有限公司博士后科研工作站、莲花健康产业集团股份有限公司博士后科研工作站、莲花健康产业集团股份有限公司博士后科研工作站、代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室天津科技大学生物工程学院、代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室天津科技大学生物工程学院 |
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