《表1 PCR引物信息Tab 1 Primers information of PCR》

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《多能干细胞关键因子Oct4 RNA结合蛋白的分离与鉴定》

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注:O5表示Oct4 5'UTR，O3表示Oct4 3'UTR。

（1） Oct4 cDNA的获得从美国国立生物技术信息中心（NCBI）公共数据库中找出Oct4 mRNA 3'UTR序列和5'UTR序列，用Premier 5.0分别设计了2对PCR引物。引物序列见表1。Trizol法抽提细胞总RNA，用Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit将细胞总RNA反转录成cDNA，以cDNA为模板进行PCR。PCR反应条件为:94℃2 min；94℃15 s，58℃30 s（Oct4 3'UTR），55℃30 s（Oct4 5'UTR）68℃30 s，共35个循环；68℃7 min。