《表1 引物列表Tab.1 List of primers》
采用RNA提取试剂盒从组织和细胞中提取RNA,RNA经DNaseⅠ消化基因组DNA后,进行苯酚/氯仿抽提、乙醇沉淀等步骤进一步纯化,最后利用Nanodrop2000超微量分光光度计其纯度和浓度.500ng RNA按照反转录试剂盒的说明反转录成cDNA后,采用SYBR Green染料方法进行实时荧光定量PCR.在ABI StepOne Plus仪器上进行PCR程序反应、数据收集和分析.PCR反应体系(20μL)为:SYBR Green mix(2×)10μL,正向引物(10μmol/L)0.8μL,反向引物(10μmol/L)0.8μL,ROX Reference Dye(50×)0.4μL和cDNA产物1μL,无菌水7μL.PCR反应程序为:95℃预变性5min和40个PCR循环反应(95℃变性15s,60℃退火30s).使用18SrRNA作为内参,引物序列如表1所示.
图表编号 | XD0017559800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.12.01 |
作者 | 郝凯丽、路兴爱、武宏春、雷伟、赵振奥、胡士军 |
绘制单位 | 苏州大学心血管病研究所、苏州大学附属第一医院心脏大血管外科、苏州大学心血管病研究所、苏州大学附属第一医院心脏大血管外科、苏州大学心血管病研究所、苏州大学附属第一医院心脏大血管外科、苏州大学心血管病研究所、苏州大学附属第一医院心脏大血管外科、苏州大学心血管病研究所、苏州大学附属第一医院心脏大血管外科、苏州大学心血管病研究所、苏州大学附属第一医院心脏大血管外科 |
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