《表1 Nrf2、GST-P1、GCLC进行PCR扩增的引物序列》

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《Nrf2信号通路在镉致大鼠生殖毒性中的作用》


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分别取睾丸、卵巢组织20~30mg,加入1mL Trizol,冰浴中充分研磨后加入三氯甲烷,剧烈振摇15s,12000r/min、4℃离心15min,取上层水相,加入异丙醇,离心后收集沉淀,沉淀用500μL 75%冰乙醇洗涤1次后,加入55℃的DEPC水,用核酸蛋白分析仪测定RNA的纯度(A260/A280=1.8~2.0)及浓度,调节各管浓度至一致。按照TaKaRa逆转录试剂盒说明书逆转录出cDNA,以cDNA为模板,加入引物和反应体系进行基因扩增。基因引物由Invitrogen公司设计提供,见表1。