《表1 qRT-PCR扩增引物序列》

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《AMF摩西球囊霉调控IAA代谢促进烟草生长》


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NtAMI1:烟草吲哚-3-乙酰胺水解酶基因;NtARF1:烟草生长素响应因子基因;NtARP1;1:烟草生长素抑制蛋白基因;NtIAA9:烟草生长素转录调控因子基因;下同NtAMI1:Nicotiana tabacum indole-3-acetamide hydrolase gene;NtARF1:N.tabacum auxin response factor1 gene;NtARP1;1:N.tabacu

分别根据GenBank(https://cipotato.org/genebankcip/)中登录的烟草序列设计特异扩增引物扩增NtAMI1等基因的特异性序列,内参基因为β-actin。扩增反应体系为:ddH2O 10μL,上、下游引物(1μmol/L)各2μL,dNTP(10μmol/L)0.4μL,3%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)0.6μL,SYBR Green I 0.5μL,Taq 0.5μL,Buffer 2μL,cDNA 2μL。PCR反应程序为:95℃60 s,95℃10 s,58℃20 s,72℃15 s,40个循环;熔解曲线从72℃至99℃,第1步维持45 s,以后每升高1℃维持5 s。用熔解曲线法检测q RT-PCR产物的特异性,采用MyiQ software进行数据分析。每个样品进行3次重复实验。反应所用引物序列如表1。