《表1 引物信息：牦牛Lkb1基因编码区克隆及其在骨骼肌的表达分析》

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《牦牛Lkb1基因编码区克隆及其在骨骼肌的表达分析》

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Lkb1:肝激酶b1；PPIA环孢素A受体；下同Lkb1:Liver kinase b1；PPIA:Peptidylprolyl isomerase A；The same below

本研究采用Trizol及酚氯仿的方法提取组织总RNA，用核酸定量仪检测其浓度（ng/μL）及OD值（OD260/OD280的比值在1.8～2.0符合要求）。总RNA按照反转录试剂盒的说明书合成cDNA备用。引物由成都擎科梓熙生物技术有限公司合成；然后进行目的基因的扩增。PCR反应体系:ddH2O 5.5μL，Taq酶PCR Master Mix 7.5μL，cDNA（200 ng/μL）1μL，上下游引物（10μmol/L，序列见表1）各0.5μL。PCR反应程序:预变性5 min（95℃），变性30 s（94℃），退火30 s（70℃），延伸90 s（72℃），设置38个循环；将PCR产物（8μL）进行1%的琼脂糖凝胶电泳，观察是否有目的条带。