《表1 引物信息：香鱼(Plecoglossus altivelis)JNK1基因克隆及其在成熟卵过熟进程中的表达变化》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《香鱼(Plecoglossus altivelis)JNK1基因克隆及其在成熟卵过熟进程中的表达变化》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

根据GenBank中已发布的鱼类JNK1蛋白的保守区域，用CodeHop在线引物设计软件（http://blocks.fhcrc.org/blocks/codehop.html）设计用于扩增香鱼JNK1基因cDNA部分序列的简并引物JNK1（+）\\JNK1（-）（表1） 。用Trizol试剂（生工生物工程 （上海）股份有限公司） 提取香鱼卵细胞总RNA，反转录合成cDNA第一链作为模板，用JNK1（+）\\JNK1（-）引物扩增香鱼JNK1基因部分序列，50μL扩增体系包括:5U/μL的Ex Taq酶（TaKaRa公司）0.25μL，10×Ex Taq Buffer（Mg2+Plus）5μL、dNTP Mixture（各2.5mmol/L）4μL，正、反向引物各0.5μL，cDNA模板1μL，ddH2O 38.75μL；PCR程序为:94oC预变性5min，（94oC变性30s，52oC退火30s，72oC合成30s） ×30个循环，72oC延伸10min。PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳后切取目的条带，用Gel Extraction Kit（OMEGA公司）纯化回收后连接入pMD-19T载体，转化入感受态大肠杆菌，挑选阳性克隆菌落送至英潍捷基（上海）贸易有限公司测序。