《表1 引物信息：藏绵羊TPI1基因的克隆及其在雄性生殖器官中的表达》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《藏绵羊TPI1基因的克隆及其在雄性生殖器官中的表达》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

TPI1：磷酸丙糖异构酶1基因；β-actin：β-肌动蛋白

以睾丸组织cDNA为模板，采用RT-PCR方法进行TPI1 CDS区序列的扩增。利用Primer Premier 6.0软件设计扩增引物，并对其特异性进行BLAST检测。引物由西安擎科生物公司合成。PCR反应体系（20μL）:cDNA 1μL，上下游引物（10μmol/L）（表1）各0.5μL，2×TransStart Fast Pfu Fly PCR SuperMix（全式金生物公司，北京）10μL，ddH2O 8μL。PCR扩增程序：95°C 3 min；95°C 30s，57°C 30 s，72°C 1 min，34个循环；72°C 5 min。扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳，以胶回收试剂盒（全式金生物公司，北京）纯化并回收目的片段，将其与pEASY-Blunt载体连接，转化至大肠杆菌（Escherichia coli）Trans1-T1感受态细胞。随机选取4个独立的阳性单菌落经PCR扩增鉴定后，送至西安擎科生物公司进行测序。