《表1 RT-FQ PCR所用引物序列》

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采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-FQ PCR)测定胶原蛋白合成分解相关基因(TGF-β1、MMP-1、MMP-8)及皮肤抗氧化相关基因(β-actin、Gsk-3β、Nrf2、HO-1、NQO-1)的相对表达量。PCR扩增总体系20μL,其中c DNA 2μL,上、下游引物各0.8μL,2×SYB Green Mix 10μL,双蒸水6.4μL。PCR扩增程序:95℃预变性5 min;95℃变性20 s,62℃退火30 s,72℃延伸20 s,共循环40次;72℃终末延伸2 min。以β-肌动蛋白(β-actin)作为内参基因,采用2-ΔΔCt法对数据进行计算处理,RT-FQ PCR所用引物序列见表1。