《表2 RT-q PCR引物》

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《β_1-AA下调脂联素水平诱发糖尿病的机制研究》


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引物由生工生物工程(北京)合成(表2),使用Trizol试剂(Invitrogen,US)从冷冻脂肪组织中提取总RNA。紫外吸收测定法测定RNA在分光光度计260 nm和280 nm处的吸收值,计算其浓度并评估RNA纯度,使用逆转录酶(Promega)进行反应,将样品RNA逆转录为c DNA。先将样品的目的基因以及管家基因进行PCR扩增,其产物进行梯度稀释用于做标准曲线,据说明书由SYBR?Premix Ex(Life Technologies,USA)定量。使用2-ΔΔCt方法,计算结果。