《表1 Bn GPATs基因及PCR引物信息》

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《13个甘蓝型油菜GPATs编码基因的酵母遗传互补功能鉴定》

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下划线指示内切酶位点

以甘蓝型油菜品种'Westar'第1链c DNA为模板进行PCR扩增，共获得13个含有脂肪酰基转移酶保守序列的目的基因，各基因的目标条带大小与预期相符（表1）。利用DNAMan （Version 7.0）进行序列预测分析，结果显示，除了Bn GPAT9-1含有1个跨膜结构域（TM2），其余12个氨基酸序列均含有2个跨膜结构域（TM1和TM2）（图2）。氨基酸序列同源性比对结果表明，来源于不同亚基因组的相同基因编码的氨基酸序列具有相对较高的同源性，但Bn GPAT3-2与其他3个Bn GPAT3存在较大差异，同源性只有55%。另外，13个基因编码的氨基酸序列均含有4个酰基转移酶保守序列（ATⅠ，ATⅡ，ATⅢ和ATⅣ），其中，Bn GPAT3-2和Bn G-PAT8-1的酰基转移酶保守结构域氨基酸残基位点变异性较大（图2）。后续实验将通过酵母遗传互补体系验证已克隆的13个基因表达产物是否具有酰基转移酶活性。