《表1 本研究使用的引物：狄斯瓦螨寄生对西方蜜蜂发育的影响》

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《狄斯瓦螨寄生对西方蜜蜂发育的影响》

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借助荧光定量PCR（q PCR）技术进行蜜蜂和狄斯瓦螨体内DWV病毒表达量分析。试验在CFX384 Touch real-time PCR system平台进行（Bio-Rad公司），检测信号为SYBR green。扩增所用引物见表1。内参基因为β-actin。每10μL PCR反应体系包括：5μL 2X Brilliant III ultrafast SYBR green q PCR mix(Stratagene公司），0.25μL上游引物（20 mmol?L﹣1），0.25μL下游引物（20 mmol?L﹣1)，0.5μL c DNA模板和4μL nuclease free water。PCR反应程序为：95℃持续3 min；紧跟40个循环，每个循环为：95℃持续10 s，接着60℃持续45 s。由CFX Manager3.1软件（Bio-Rad公司）自动输出CT值，然后，利用比较CT值法（ΔΔCT，(Schmittgen and Livak，2008）计算DWV相对表达量。