《表1 基因引物序列：育王时额外添加叶酸对西方蜜蜂蜂王质量的影响》

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《育王时额外添加叶酸对西方蜜蜂蜂王质量的影响》

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根据Gen Bank中的相关序列，用Primer 5.0软件设计引物序列，由上海生物有限公司合成（表1），以β-肌动蛋白（β-actin）作为内参基因。荧光定量PCR的反应体系为10μL，包括c DNA 1μL，SYBRPremix Ex TaqTMⅡ5μL，Rox 0.2μL，上游、下游引物各0.4μL，超纯灭菌水3μL，混匀后放入荧光定量PCR仪中进行扩增。反应条件:95℃30 s；95℃10 s，60℃1 min，40个循环；之后50℃加热到90℃（每6 s升高1℃）。建立熔解曲线，收集目的基因与内参基因的Ct值[16]，并参考Qiang等[17]的方法计算各个目的基因的相对表达量。