《表2 引物序列：锰对意大利蜜蜂成年工蜂生理机能的影响》

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《锰对意大利蜜蜂成年工蜂生理机能的影响》

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用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测各组成年工蜂锰相关基因表达量的表达量。在7、14、21日龄时，各组分别取出25只蜜蜂，每5只蜜蜂为1个重复，采用总RNA提取试剂盒Ⅱ提取样品总RNA。利用反转录试剂盒将总RNA立即反转录成cDNA，随后将cDNA样品浓度调节为相同水平后，-20℃保存待用。参照FastStart Universal SYBR Green M aster操作指南配制20μL体系，使用ABI 7500型实时荧光定量PCR仪检测锰相关基因相对表达量。以β-肌动蛋白（β-actin）为内参基因，目的基因引物设计参考序列来自于NCBI数据库，委托上海生工生物科技有限公司完成，引物序列如表2所示。