《表1 本研究所用的引物:蜜蜂球囊菌菌丝和孢子中长链非编码RNA的比较及潜在功能分析》

《表1 本研究所用的引物:蜜蜂球囊菌菌丝和孢子中长链非编码RNA的比较及潜在功能分析》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《蜜蜂球囊菌菌丝和孢子中长链非编码RNA的比较及潜在功能分析》


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随机选取4个DElnc RNA(TCONS_00006988、TCONS_00003707、TCONS_00001814、TCONS_00007359)进行RT-q PCR验证。参照郭睿等[26]方法设计合成DElnc RNA的特异性上游引物和下游引物。选择actin(5417)作为内参基因。相关的引物信息详见表1。利用RNA提取试剂盒(Ta Ka Ra公司,日本)分别提取球囊菌菌丝和孢子的总RNA,使用c DNA第1链合成试剂盒(上海翊圣,中国)对提取的RNA进行反转录,得到相应的c DNA作为q PCR的模板。q PCR反应体系为20μL:SYBR Green Dye 10μL,上下游引物各1μL(10μmol·L-1),c DNA模板1μL,DEPC水7μL。配制的反应体系在ABI Quan Studio 3荧光定量PCR仪(ABI公司,美国)中进行反应。q PCR程序:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,53℃退火40 s,72℃延伸30 s,共40个循环。每组q PCR反应设置3次技术重复。采用2-??Ct方法计算DElnc RNA的相对表达量。利用Graph Pad Prism 7软件(Graph Pad公司,美国)进行数据的Student’s t-test和相关绘图。