《表1 引物序列:黄芪多糖对C3H10T1/2细胞棕色脂肪分化中长链非编码RNA表达谱的影响》

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《黄芪多糖对C3H10T1/2细胞棕色脂肪分化中长链非编码RNA表达谱的影响》


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注:F为上游引物;R为下游引物

使用Trizol誖Reagent试剂盒提取总RNA,提取后用1%琼脂糖凝胶电泳检测其是否降解,并用Nanodrop ND-1000进行浓度与完整性检测,选取OD260nm/OD280nm为1.9~2.0者用于后续试验。RNA经DNA酶处理后,取1μg进行cDNA反转录,并进行q RT-PCR分析。扩增程序为:95℃预变性20 s;95℃变性20 s,60℃退火及延伸20 s,36个循环。结果根据2-ΔΔCT法计算,18S r RNA基因为内参基因,引物序列见表1。