《表1 引物序列:油酸对延边黄牛前脂肪细胞分化过程的影响》

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《油酸对延边黄牛前脂肪细胞分化过程的影响》


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用Trizol法提取脂肪细胞总RNA,参照TaKaRa的反转录试剂盒说明书进行cDNA的合成。参照GenBank中已公布的牛GAPDH、PPARγ、SREBP1、LPL和C/EBPβ基因mRNA序列,用Primer Premier5.0软件设计扩增各基因CDS区部分序列引物,GAPDH作为内参基因。引物序列参照表1,反应体系为反应体:SYBR 10μL,Dye 0.5μL,上下游引物各0.5μL,cDNA模板1μL,ddH2O7.5μL,总体积为20μL[13]。反应条件(采用三步法):预变性95℃15s,变性95℃5s,退火55℃30s,延伸72℃30s,共40个循环。