《表1 茶叶品质相关基因定量PCR引物》

《表1 茶叶品质相关基因定量PCR引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《不同水分条件下AM真菌对福鼎大白茶生长和茶叶品质的影响》


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叶片总RNA使用Ta Ka Ra Mini BEST Plant RNA Extraction Kit(日本Takara生物公司)进行提取。RNA反转录使用Prime Script TM RT reagent kit with g DNA eraser(日本Takara生物公司)试剂盒进行。利用q RT-PCR测定茶叶品质相关基因谷氨酸脱氢酶(Cs GDH)、谷氨酰胺合成酶(Cs GS)、谷氨酰胺α-酮戊二酸氨基转移酶(Cs GOGAT)和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因(Cs HMGR)的相对表达量。基于NCBI数据库获得茶树相关基因序列,其特异性引物采用Primer 5设计(表1),由上海生物工程技术服务有限公司合成。以GADPH基因作为内参基因,q RT-PCR在CFX96 real time PCR detection system(美国伯乐生命医学产品有限公司)实时定量PCR仪上进行。PCR反应体系为10μL,包括5μL SYBR GREEN PCR Master Mix (Applied Biosystem)、3.5μL dd H2O、0.5μL c DNA,正义引物和反义引物各0.5μL。基因相对表达量测定和定量结果分析参照文献[13]。