《表1 相关基因荧光定量PCR引物序列》

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《日龄对麻鸭脂肪沉积及相关基因表达的影响》


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按顺序依次进行组织总RNA的抽提、定量、设计引物(表1)、总RNA的反转录(反应条件:37℃、15 min,85℃、5 s,4℃、∞;合成的cDNA产物放于-20℃保存备用)、PCR(PCR扩增条件:94℃预变性5 min,94℃变性30 s,58℃退火30 s,72℃延伸1 min,共30个循环,72℃延伸10 min)以及实时荧光定量PCR实验(反应条件:95℃预变性30 s;95℃变性5 s,60℃退火和延伸45 s,共40个循环,并采集荧光信号,检测各个基因的扩增变化情况,记录Ct值)。