《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《VEGFA/VEGFR2在小鼠肝多房棘球蚴组织血管生成中的表达及作用》

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TRIzol法提取正常肝组织、多房棘球蚴组织、多房棘球蚴周围肝组织、原头节和肝细胞的RNA，分光光度计测定RNA浓度。以RNA为模板扩增cDNA。以cDNA为模板，GAPDH为内参，扩增目的基因。引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成（表1）。扩增体系（20μl）为2×SYBR qPCR预混液10μl，上、下游引物各1μl，cDNA2μl，ddH2O 6μl。反应条件为：95℃3 min；95℃10 s，60℃45 s，39个循环。以β-actin作为内部标准化参照，每对引物设立阴性对照。采用2-△△Ct法计算mRNA的相对表达水平。