《表1 引物序列:非洲猪瘟病毒p72蛋白的原核表达和多克隆抗体制备》

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《非洲猪瘟病毒p72蛋白的原核表达和多克隆抗体制备》


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笔者设计了p72(1-171aa)基因的特异性引物(表1),以合成的p72全长基因为模板,PCR扩增目的基因,胶回收反应产物,经Eco RI和Xho I酶切并纯化,与经相同酶切处理的p ET-28a载体连接,产物转化至TOP10感受态细胞。挑取单个菌落扩大培养,质粒小提试剂盒提取p ET-28a-p72(1-171aa)质粒。而p ET-28a-p72和p CAGGS-myc-p72则皆为通过Eco RI和Xho I酶,与分别p ET-28a和p CAGGS-myc连接形成。通过双酶切提取的质粒DNA和北京擎科新业生物技术有限公司进行测序,鉴定构建的质粒为正确。