《表1 引物序列：烟草NtGCN2的原核表达、纯化及多克隆抗体制备》

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《烟草NtGCN2的原核表达、纯化及多克隆抗体制备》

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GCN2:General control non-derepressible-2

以NtGCN2（GenBank登录号:KJ706220）序列设计引物进行PCR扩增（表1）。扩增体系（50μL）:150 ng/μL模板（前期获得的p MD19-NtGCN2质粒为模板 （张康旭等，2014）） 2μL，上下游引物（10μmol/L）各1μL，5μL 10×buffer，4μL d NTP，1μL DNA聚合酶，36μL ddH2O。扩增条件:94℃5min；94℃30 s，65℃30 s，72℃45 s，共30个循环。产物回收后经双酶切鉴定后与载体pET15b、p Czn1进行连接、转化。提取质粒进行PCR验证并测序。