《表1 本研究所用的si RNA序列》

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《CG8005基因在果蝇睾丸生殖细胞中的功能分析》

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利用快冻慢融的原理复苏果蝇S2细胞后，放入DMEM+10%胎牛血清（以色列Bioind公司）配制的培养基中进行培养，培养环境为28℃恒温培养箱（上海精宏实验设备有限公司），根据细胞生长速度和状态，及时进行细胞换液和细胞传代，并以适当密度重新接种至新的培养瓶中继续培养[17]。待细胞生长至80%～90%密度后进行转染。转染步骤如下：由苏州吉玛基因公司设计并合成si RNA序列，使用Lipo2000脂质体（美国Invitrogen公司）转染S2细胞。使用250μL Opti-MEM （美国Gibco公司）稀释成15μL的Lipo2000，轻轻混匀后室温放置5 min，在250μL opti-MEM中加入15μL小干扰RNA （si RNA），将两管混合物充分混匀后，室温放置20 min，使si RNA终浓度为150 nmol/L作为最终培养基加入细胞培养板中，6 h后更换成完全培养基继续培养至48 h。si RNA序列见表1。