《表1 qRT-PCR引物序列》

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《老年冠心病慢性心衰患者血清miR-214 galectin-3表达及其预后相关性研究》

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采用RNA提取试剂盒提取血清总RNA，反转录试剂盒将RNA反转录得c DNA，具体操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。采用qRT-PCR法检测血清中miR-214表达水平，采用qRT-PCR仪对miR-214及其内参U6进行扩增。反应体系共20μL:c DNA模板（50ng/μL） 2μL，mi Script SYBRGreen Mix10μL，上下游引物（10μM）各0.8μL，dd H2O 6.4μL。反应条件:95℃预变性5min；95℃30s，58℃30s，72℃30s，40个循环。miR-214及内参U6的引物序列见表1，引物由上海生工生物工程股份有限公司设计并合成。每份样品均设3个重复孔，采用2-△△CT法计算血清miR-214相对表达量。