《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《精胺对雌鹅卵巢生殖激素受体基因表达的影响》


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实时荧光定量反应体系为50μL:iQTM SYBR?Green Supremix(Bio-Rad,USA)25.0μL,上、下游引物(10μmol/L)各2.0μL,cDNA模板2.0μL,RNase Free H2O 19.0μL。反应条件:95℃预变性3 min;95℃变性10 s,依据表1中引物退火温度退火30 s,72℃延伸30 s(采集荧光),45个循环;95℃10 s,60℃1 min,绘制熔解曲线。以GADPH作为内参基因,按照上述实时荧光定量PCR反应体系和反应参数设置,定量检测四川白鹅卵巢组织样品中FSHR、LHR、ER1和ER2基因相对表达量,每个样品设3个重复。实时荧光定量PCR引物序列见表1。