《表1 蓝莓花色苷提取物中花色苷组成鉴定》

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《蓝莓花色苷对脂多糖诱导RAW 264.7细胞炎症及结肠癌细胞增殖、凋亡的影响》


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注:I.芍药素3-葡萄糖苷与锦葵色素3-半乳糖苷共同洗脱;II.芍药素3-阿拉伯糖苷与锦葵色素3-葡萄糖苷共同洗脱。

蓝莓提取物总花色苷含量为312.75 mg/g(以矢车菊素3-葡萄糖苷质量计,下同),高于文献中报道的黑米、葡萄、紫薯等其他富含花色苷的植物提取物中花色苷含量[21]。Hwang等[22]使用体积分数70%乙醇溶液提取制备的蓝莓提取物花色苷含量仅为11.8 mg/g。蓝莓提取物总花色苷含量测定结果说明本实验的提取、纯化方法能够有效地提取、富集花色苷。图1为蓝莓提取物花色苷组成色谱图,共有12个峰。参考文献和MS数据(表1)可知:色谱峰1与色谱峰2有相同的分子离子峰(m/z 465)和碎片峰(m/z 303),Primetta等[23]报道了飞燕草素-3-半乳糖苷优先于飞燕草素-3-葡萄糖苷洗脱,因此判断色谱峰1为飞燕草素-3-半乳糖苷,色谱峰2为飞燕草素-3-葡萄糖苷;同理,判断色谱峰3和色谱峰5分别为矢车菊素3-半乳糖苷和矢车菊素-3-葡萄糖苷,判断色谱峰8和色谱峰10分别为芍药色素-3-半乳糖苷和芍药色素3-葡萄糖苷;色谱峰4和色谱峰7有离子峰(m/z 435)、(m/z 419)和分子离子峰(m/z 303)、(m/z 287),而碎片峰(M+-132)代表分子离子峰缺少一个阿拉伯糖,因此色谱峰4为飞燕草素-3-阿拉伯糖苷,同理,判断色谱峰7、9、12分别为矢车菊素-3-阿拉伯糖苷、牵牛花色素-3-阿拉伯糖苷和锦葵色素-3-阿拉伯糖苷;另外,质谱分析发现,在28.6 min,除了芍药色素-3-半乳糖苷,还有锦葵色素-3-半乳糖苷出现,而在液相色谱图中只有色谱峰10出现,因此推测二者为共同洗脱,同理推测色谱峰11为芍药色素-3-葡萄糖苷和锦葵色素-3-葡萄糖苷的共同洗脱峰。这与文献报道的在蓝莓、蓝靛果等浆果的花色苷组成分析中出现共同洗脱现象相似[24]。根据表1对液相色谱图的峰面积统计可得:该蓝莓提取物中质量浓度最高的4种花色苷为:飞燕草素-3-半乳糖苷(51.66μg/mL)、飞燕草素-3-阿拉伯糖苷(34.33μg/m L)、飞燕草素-3-葡萄糖苷(27.21μg/m L)、矢车菊素-3-阿拉伯糖苷(28.08μg/mL)。飞燕草素家族花色苷广泛存在于果蔬中,已经被证明能够通过抗氧化作用抑制肿瘤的发生、迁移[25],蓝莓提取物中飞燕草素家族花色苷在总花色苷组成中占很大比例,因此推测蓝莓提取物具有抑制炎症、抗癌的作用。