《表2 PCR引物及其反应条件参数》
将提取到的大豆基因组DNA进行核酸定性PCR检测,分别对外源基因CP4-EPSPS、NOS和Ca MV35S和内源基因Lectin进行扩增,引物参数如表2。核酸定性PCR扩增体系(20μL)如下:2×SGExcel SYBR:10μL;正义引物:0.5μL;反义引物:0.5μL;DNA模板:9μL核酸定性PCR引物序列,反应循环参数如表2所示。PCR扩增完成后,用1×TAE电泳缓冲液制备2%的琼脂糖凝胶(等凝胶融化后冷却到60℃左右时加入溴化乙锭)。将PCR扩增产物(5μL)与上样缓冲液6×Loading Buffer(1μL)按比例均匀混合,然后分别加入对应的凝胶孔中,同时加入1μL DNA分子量标记物Ladder H2(50~1031 bp)和相应的DNA样品,将电压调至90 V进行电泳30 min。用凝胶成像分析系统进行观察分析并记录结果[11]。Ca MV35S目的基因片段为195 bp,NOS目的基因片段为180 bp,CP4-EPSPS目的基因片段为320 bp,Lectin目的基因片段为438 bp。
图表编号 | XD00157575000 严禁用于非法目的 |
---|---|
绘制时间 | 2020.07.20 |
作者 | 王茂先、肖亮媛、吴丹霞、邓钰婷、王新彦 |
绘制单位 | 韩山师范学院食品工程与生物科技学院、韩山师范学院食品工程与生物科技学院、韩山师范学院食品工程与生物科技学院、韩山师范学院食品工程与生物科技学院、韩山师范学院食品工程与生物科技学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |