《表2 PCR引物及反应条件》

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《马铃薯疮痂病病原菌鉴定及其生物学特性》


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txtAB:毒素合成基因;tomA:致病性因子基因;nec1:诱导坏死蛋白基因

菌株PS1的DNA提取按照TIANamp Bacteria DNA Kit细菌基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)(北京天根生化科技有限公司) 说明书进行。以特异性引物TxtAB1-TxtAB2、TomF-TomR、Nf-Nr为扩增引物,检测菌株PS1的致病基因txtAB、tomA、nec1。PCR引物序列及反应条件如表2所示。PCR反应体系(25μL):ddH2O 17.2μL,10×PCR Buffer2.5μL,dNTPs(2.5 mmol/L)2μL,上、下游引物(10pmol/μL)各1μL,DNA模板(80 ng/μL)1μL,Taq DNA聚合酶(5 U/μL)0.3μL。PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳检测。将PCR产物送至上海生工生物工程股份有限公司进行测序,测序所得结果与GenBank核酸数据库进行比对。