《表1 引物序列及PCR反应条件》

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《丙泊酚抑制缺氧/复氧HUVECs细胞中miR-15b表达及细胞凋亡的实验研究》

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3实时定量PCR（RT-qPCR）按RNAisoTM Plus试剂盒说明书，提取各组细胞中总RNA；检测RNA质量。根据PrimerBank公布的基因序列，设计miR-15b、bcl-2及内参U6的引物序列（见表1）；按试剂盒说明，反转录合成miR-15b、bcl-2cDNA；根据实时定量PCR试剂盒说明配制反应体系后加样，以U6为内参，进行PCR反应，具体反应条件（见表1）。12%聚丙烯酰胺凝胶电泳后，应用凝胶图象成像系统（Alpha Innotech公司）检测PCR产物质量。每个样本设置2个复孔，每批样本设置1孔空白对照。目的基因miR-10b、bcl-2的相对表达量采用公式2-△△Ct（△Ct=目的基因Ct值-内参照Ct值，△△Ct=实验组△Ct-对照组△Ct）进行计算。