《表3 不同pH处理条件下皮层裂解酶CwlJ酰胺I带二级结构相对含量》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《pH值对芽孢皮层裂解酶活性及结构的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

图4为p H值为3、5、7、9、11的CwlJ的酰胺I带经去卷积和二阶导数处理后获得的叠加峰分解为各个子峰的高斯曲线拟合峰图。由表2和表3的峰面积比例求出其结构归属。CwlJ的二级结构主要组成为α-螺旋，其次是β-折叠、β-转角、无规则卷曲；大小为α-螺旋>β-折叠>β-转角>无规则卷曲。经过pH处理后的CwlJ的二级结构发生如下变化：1）随着pH的增大，α-螺旋先增大后减小，pH值从3到9，α-螺旋逐渐增大；pH值从9到11，α-螺旋不断的减小。α-螺旋是蛋白质的二级结构中最稳定的，随着pH的增大，蛋白质的二级结构发生重新排列[29]，蛋白质的结构稳定性下降，直接导致CwlJ的α-螺旋中的C=O双键电子云密度不稳定，氢键直接断裂并与其他极性基团发生氢键键合，发生解螺旋，影响皮层裂解酶CwlJ活性中心的构象，活性变低；2）随着pH的增大，无规则卷曲状态先增大后减小，pH值从3到7，无规则卷曲状态由15.13%增加到17.18%，pH值从7到9，无规则卷曲状态由17.18%降低到15.46%，表明随着pH的增加，CwlJ的二级结构先从有序状态逐渐向无规则状态转化，当pH值达到7以上时，CwlJ的二级结构即从无规则状态逐渐向有序状态转化[30]。由此可证明pH处理可能会导致CwlJ发生水解，空间结构呈无序状态，造成酶活降低；3）随着pH的增大，β-转角先减小后增大，pH值从3到5，β-转角由22.43%降低到19.37%，当pH值从5到11，β-转角由19.37%增加到21.38%，β-转角本身属于无序结构，经处理后，β-转角结构很有可能会向无规则卷曲状态转化[31-32]。这种转化趋势与高pH处理下CwlJ的变性和逐渐形成分散体的形态有关，外界对芽孢的一些处理条件下，芽孢的不萌发和保持休眠态的特性可能也与CwlJ的变性以及CwlJ的内部结构分散有紧密的联系；4）随着pH的增大，β-折叠先增大后减小，pH值从3到7，β-折叠相对含量不断增加，β-折叠由26.29%增加到26.31%，pH值从7到11，β-折叠由26.31%增加到26.76%，由于β-折叠比较常见于蛋白质的内部结构区域，pH增加使得蛋白质发生解聚现象是β-折叠先增加的原因，随着体系完全成为碱性时，蛋白质大分子因为碱性而聚集的现象导致β-折叠结构减少，由此可推断β-折叠结构在碱性聚集体形成的过程中起到重要作用，碱性聚集体的形成使CwlJ的活性中心被包埋，进而导致活性降低。