《表2 目标基因扩增引物及其相关信息》

《表2 目标基因扩增引物及其相关信息》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《贵州小麦品种(系)籽粒低PPO活性种质资源筛选》


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采用CTAB法提取供试小麦叶片DNA(徐如宏等,2005),以分光光度计检测其浓度和纯度,保证OD260/OD280约为1.8,然后稀释至100 ng/μL作为模板备用。利用位于2A和2D染色体上的STS分子标记PPO16、PPO18和PPO29检测小麦PPO活性相关基因,引物序列及相关信息详见表2。PCR反应体系20.0μL:含2×Taq PCR MaserMix 7.0μL,上、下游引物各1.0μL,DNA模板2.0μL,ddH2O补足至20.0μL。扩增程序:94℃预变性5 min,94℃45 s,60/64℃45/50 s,72℃1 min,进行37/40个循环;72℃延伸10 min。扩增产物利用1.5%琼脂糖凝胶电泳进行检测,电泳缓冲体系0.5×TAE,120 V下电泳50 min,于紫外灯下观察、照相并记录。