《表2 目标基因扩增引物及其相关信息》
采用CTAB法提取供试小麦叶片DNA(徐如宏等,2005),以分光光度计检测其浓度和纯度,保证OD260/OD280约为1.8,然后稀释至100 ng/μL作为模板备用。利用位于2A和2D染色体上的STS分子标记PPO16、PPO18和PPO29检测小麦PPO活性相关基因,引物序列及相关信息详见表2。PCR反应体系20.0μL:含2×Taq PCR MaserMix 7.0μL,上、下游引物各1.0μL,DNA模板2.0μL,ddH2O补足至20.0μL。扩增程序:94℃预变性5 min,94℃45 s,60/64℃45/50 s,72℃1 min,进行37/40个循环;72℃延伸10 min。扩增产物利用1.5%琼脂糖凝胶电泳进行检测,电泳缓冲体系0.5×TAE,120 V下电泳50 min,于紫外灯下观察、照相并记录。
图表编号 | XD00156672500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.03.01 |
作者 | 晏权、任明见、李振华、徐如宏 |
绘制单位 | 贵州大学农学院、国家小麦改良中心贵州分中心、贵州大学农学院、国家小麦改良中心贵州分中心、贵州大学农学院、国家小麦改良中心贵州分中心、贵州大学农学院、国家小麦改良中心贵州分中心 |
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