《表1 用于鉴定目标基因的分子标记及其引物信息》

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《抗稻瘟病基因Pib、Pita、Pi5、Pi25和Pi54在我国水稻微核心种质中的分布》

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采用CTAB方法提取水稻幼苗的基因组DNA[2]。用于PCR扩增的引物名称、序列及预期片段长度列示于表1。PCR扩增反应体系为10μL，含1.0 mL 10×缓冲液（无Mg2+），0.2 mL dNTP（各2.5 mmol/L) ，0.6 mL MgCl2（25 mmol/L），1 mL引物（2.5 mmol/L，F+R) ，0.1 mL Taq酶（5 U/μL) ，1 mL DNA (100 ng/μL）和6.1 mL ddH2O。PCR扩增程序：94℃5 min；94℃30 s，57℃30 s，72℃30 s，35个循环；72℃7 min。扩增产物用2%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色，在紫外灯下观察并用凝胶成像系统拍照。每个DNA样品重复扩增并电泳检测3次以上，以确保扩增结果准确、可靠。