《表3 用于野生亚麻分子标记分析的SSR引物》

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《8个地方野生亚麻资源发掘及遗传多样性分析》

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利用培养皿萌发种子，长出幼苗后，参照Porebski等（1997）的CTAB法提取亚麻基因组DNA，用0.8%琼脂糖电泳检测其DNA的纯度及完整性。利用自己实验室开发的5对EST-SSR引物和Cloutier等（2012）开发的4对EST-SSR引物对8份野生亚麻进行了遗传多样性分析（表3）。PCR反应体系（20μL）:2×Taq PCR MasterMix 10μL，上下游引物各1μL，60～100 ng模板DNA 2μL，其余用ddH2O补齐。PCR反应程序为:95℃预变性5 min，95℃变性45 s、不同退火温度复性45 s、72℃延伸45 s，共35次循环，72℃延伸10 min，4℃保存。扩增产物用6%的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，恒电压200 V电泳100 min，硝酸银染色，统计条带。利用NTSYSpc 2.10对电泳数据进行分析，聚类作图。