《表8 刺槐种群14个SSR分子标记引物信息》

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《基于SSR分子标记的刺槐遗传多样性分析及核心种质的构建》

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SSR-PCR扩增：选择了21个SSR引物（Lian and Hogetsu，2002；Lian et al.，2004；Mishima et al.，2009）进行预实验，最终选取了14对引物（表8），采用总体积为10μL的优化反应体系，20 ng DNA模板，0.5μL上引物，0.5μL下引物，5μL RR901A Mix混合液（TaKaRa，Bio），1μL双蒸水。PCR仪（T100，BIO-RAD）进行扩增，反应程序为：94℃预变性5 min，94℃下变性30 s，共10个循环，退火温度从63℃到53℃（每个循环下降1℃），每个循环30 s，72℃延伸90 s，共20个循环，72℃后延伸10 min，4℃保存。8%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物，在200 V电压下电泳70 min，硝酸银染色，显色液及蒸馏水洗净，在灯箱下进行条带观察统计，并拍照保存图像。