《表1 SSR引物序列:一个大豆矮秆性状基因的分子标记定位》

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《一个大豆矮秆性状基因的分子标记定位》


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以大豆(海系13×北农103)F4RHL的F2分离群体为分析材料,从中各选取6个髙秆单株和6个矮秆单株,采用BSA法,建立高秆和矮秆2个近等基因池,利用大豆630对SSR引物进行PCR扩增,在8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱中,分析筛选2个近等基因池间具有多态性的SSR引物。经多次PCR筛选,在630对SSR引物中,获得25对具有多态性的引物,占总引物的4%,扩增产物表现出2~3条电泳谱带,在150~300bp之间。在此基础上,利用RHLF2高矮秆分离材料中的30个髙秆和30个矮秆单株,继续对25对引物的扩增结果进行验证,发现在25对引物中,9个引物所产生标记与GmD1具有连锁关系,分别为Satt527,Satt166、Sat_340、Satt481、Sat_150、Sat_245、Satt076、Satt229和Satt664。为进一步分析这9对引物产生的标记与GmD1的连锁距离,以(海系13×北农103)RHLF2分离群体共201个单株进行PCR检测,其中高秆139个,矮秆62个。检测结果表明,9个SSR引物(表1)扩增产生标记均与矮秆基因GmD1紧密连锁(表2),其中3对引物的PCR结果见图2。