《表3 SRAP引物序列：利用SRAP分子标记研究山西省野生山丹的遗传多样性》

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《利用SRAP分子标记研究山西省野生山丹的遗传多样性》

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山丹基因组总DNA提取采用改良的CTAB法，提取后DNA通过1%的琼脂糖凝胶电泳进行质检，并溶于1×TE缓冲液保存于-20℃备用。PCR反应体系为20μL，其中10×PCR buffer 5μL（含Mg2+）、2.5 mmol·L-1d NTPs 2μL、5 U·μL-1Taq酶0.3μL、50 ng·μL-1引物各2μL、30 ng·μL-1DNA 1μL、dd H2O 9.7μL。PCR反应程序为：（1）94℃预变性5 min；（2）94℃变性1 min，35℃退火1min，72℃延伸80 s（5个循环）；(3） 72℃延伸10min；（4） 94℃变性1 min，50℃退火1 min，72℃延伸80 s（37个循环）；(5） 72℃延伸12 min。扩增产物采用6%聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测，银染后拍照保存。PCR buffer、d NTPs、Taq酶均购买于江苏康为世纪生物科技有限公司，试验引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，引物序列见表3。