《表2 SRAP引物序列:87份中熟棉种质资源亲缘关系和遗传多样性研究》

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《87份中熟棉种质资源亲缘关系和遗传多样性研究》


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在20μL的反应体系中各成分为:模板DNA约60 ng、10×Buffer2μL、Mg2+2 mmol/L、Taq聚合酶1 U、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.6μmol/L。SRAP引物序列参考Na Ren[18],Jicheng Han[19],巫有霞等[20]的文献选用10条正向引物和8条反向引物(表2),由上海生工生物公司合成。使用美国ABI公司生产的Veriti 96 well PCR仪进行SRAP-PCR扩增反应,参考Li和Quiros发表的文献[7],设计扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环,94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,35个循环,最后72℃延伸10 min,4℃保存。