《表2 第3条引物及序列：苹果属种质TP-M13-SSR亲缘关系及遗传多样性分析》

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《苹果属种质TP-M13-SSR亲缘关系及遗传多样性分析》

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采用德国QIAGEN的DNeasy Plant Mini Kit试剂盒分别提取各供试材料春季嫩叶基因组DNA。选取245对扩增片段长度在100～300 bp的普通SSR序列，参照YAMAMOTO等[13]、GIANFRANCESCHI魣等[14]、LIEBHARD等[15]和高源等[16]的研究，共合成16对TP-M13-SSR引物。TP-M13-SSR引物是由3条引物组成，其中，第1条引物是普通SSR引物的正向引物；第2条引物由带有M13接头的正向引物和普通SSR引物的反向引物相连而成；第3条引物是5′端带有荧光标记的M13正向引物。上海Sangon公司合成第1、2条引物；美国ABI公司合成第3条引物，5′端带有荧光标记的M13正向引物标记的3种荧光分别为6FAMTM(Blue）、VICTM(Green）和NEDTM(Yellow）（表2）。