《表3 耐药基因扩增引物及相关信息》

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《致病性海洋弧菌对氨基糖苷类药物的耐药传递机制初步研究》

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挑取活化的受试菌单菌落分别接种于含有2%Na Cl的35 m L营养肉汤培养基中，28℃摇床培养过夜，分别按照高纯质粒DNA微量提取试剂盒和细菌基因组DNA提取试剂盒操作步骤进行操作，分别获得质粒DNA和基因组DNA，进一步回收DNA后用纯化试剂盒进行纯化。根据GENBANK中aph（3′）-IIa的碱基序列进行耐药基因扩增引物的设计，并采用聚合酶链式反应法对耐药基因进行扩增。引物序列见表3，PCR反应体系见表4。PCR反应条件为:94℃预变性2 min，94℃变性50 s，60℃退火45 s，72℃延伸1 min，35个循环，72℃保持5 min，4℃保存。