《表2 Rosetta-VIP计算设计突变位点及其能量、溶剂可及表面积和序列保守性》
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《基于多重计算设计策略提高枯草芽孢杆菌脂肪酶的热稳定性》
利用Rosetta-VIP对枯草芽孢杆菌脂肪酶A结构进行分析,共计算设计出16个有利于结构空腔填充(ΔΔE<0)的单点突变,对其能量变化、溶剂可及表面积和序列保守性分析,如表2所示。ΔΔE值越小,表示设计的突变体比野生型越稳定,其中突变体F17A、F19W、L114P、I135V和I157L的ΔΔE<-5.0,预测这5个突变体热稳定性较高,其中I157L(ΔΔE=-9.57)是设计的16个突变体中能量降低最多的。同时,这5个突变体的ΔSASA<0,突变体中对应突变位点的溶剂可及表面积减少,更有利于蛋白的稳定,其中F17A的溶剂可及表面积是16个突变体中减少量最多的(ΔSASA=-90.33?2),F19W的溶剂可及表面积变化较小(ΔSASA=-0.21?2)。并且F19W没有出现在序列比对的500条同源序列中,不符合蛋白进化保守性,是不利突变的可能性大,其余4个点突变符合蛋白进化保守性。
图表编号 | XD00154169400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.08.25 |
作者 | 向玉、张萌、许菲 |
绘制单位 | 江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室、江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室、江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室 |
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