《表1 各q PCR引物序列》

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《汉防己甲素对卵蛋白诱导大鼠哮喘模型的抗氧化保护作用》


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采用qRT-PCR法。取大鼠肺组织,剪碎加入1ml TrizolTM试剂提取肺组织RNA,按照反转录试剂盒说明,将RNA反转录成cDNA,取cDNA产物2μl,加入SYBR Green Mix 12μl、上游引物和下游引物(见表1)各0.5μl,并加入双蒸水(ddH2O),体系总体积为20μl,进行q-PCR扩增。反应程序:95℃5min,1个循环;95℃15s,58℃30s,72℃30s,40个循环;95℃15s,58℃15s,1个循环。读取各个扩增反应的Ct值,利用2-ΔΔCt法计算Nrf2、HO-1、TGF-β1、MMP-9、TIMP-1的mRNA表达水平。