《表1 试验中所用的引物一览表》

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《桂花‘莲籽丹桂’芳樟醇合酶基因OfTPS5的克隆及功能鉴定》


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Trizol法提取花瓣RNA并反转录为cDNA,根据桂花基因组(http://49.4.123.156:9001/)进行BLAST比对并根据序列设计引物OfTPS5-F/R(表1),扩增开放阅读框(ORF)序列。95℃预变性反应1 min;95℃变性反应30 s,65℃退火反应为20 s,72℃延伸反应80 s,循环32次;72℃延伸10 min,20℃保温30 min。PCR产物经凝胶电泳检测并回收目的条带,连接到pEASYTM-T1Simple载体并转化到大肠杆菌克隆感受态细胞Trans1-T1,进行测序。