《表1 rab7、rilp、rep1、GAPDH引物序列》
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《dCas9-gRNA在卡介苗侵染小鼠巨噬细胞过程中对rab7的调控作用》
提取各组细胞的RNA,取1μg RNA经过逆转录得到cDNA,反应体系20μL。利用实时荧光定量PCR检测各组细胞内rab7、rilp、rep1 mRNA的表达量。利用系统进行数据分析,自动设置基线和阈值,采用2-ΔΔCt法计算定量,对照组被归一化处理。选用GAPDH为内参基因,总反应体系为20μL,荧光定量PCR反应条件:95℃预变性10 min×1;95℃变性10 s,60℃退火30 s,72℃延伸30 s×40。溶解曲线的设定条件:9 5℃1 min,55℃30 s,95℃30 s×1。反应结束后2%琼脂糖电泳进行验证。利用Primer5.0软件设计引物,mRNA检测的引物序列及条件,见表1。
图表编号 | XD00138770300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.02.20 |
作者 | 郭越、杨文淇、关松磊 |
绘制单位 | 吉林农业大学生命科学学院、吉林农业大学生命科学学院、吉林农业大学生命科学学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |