《表1 HER4及GAPDH引物序列》

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《不同病理分级胶质瘤中人表皮生长因子受体-4的表达研究》


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注:对样品中检测基因mRNA的相对表达量进行计算,△CT(目的基因)=CT(目的基因)-CT(内参);△△CT=△CT(目的基因)-△CT(标准值);目的基因的相对量计算为2-△△Ct。

Trizol试剂购自美国Invitrogen公司,逆转录试剂盒购自宝生物工程(大连)有限公司,引物由上海生工公司提供,引物序列见表1。Trizol法提取总RNA,测定RNA浓度、纯度和完整性;设计合成引物;按照逆转录试剂盒说明进行逆转录反应,-20℃保存;实时荧光定量PCR,并在PCR仪中运行如下程序:95℃5 min,1个循环;95℃10 s,56℃30 s,72℃30 s,40个循环。